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小鼠抗单核细胞抗体ELISA试剂盒操作步骤

关 键 词
古朵生物,小鼠ELISA试剂盒
资料类型
docx
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898
上传时间
2020年03月24日 17:19
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上海古朵生物科技有限公司
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资料简介


中文全称:小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒
英文名称:Mouse anti-Monocyte antibody,AMA ELISA kit
供应商:上海古朵生物
产品规格:48T/96T
产地:国产/进口
样本:血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆及相关液体样等
标记物:人,大鼠,小鼠,豚鼠,猪,牛,羊等种属
应用:科研实验
检测方法:双抗体夹心法,间接法,竞争法等
检测限:人,大鼠,小鼠,豚鼠,猪,牛,羊等种属


小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA检测试剂盒应用范围可概括四个方面:
1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
2、研究抗酶抗体的合成。
3、显现微量的免疫沉淀反应。
4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

 

样本处理方法
植物样本:
1,样本在保持鲜重的同时,重量不能低于50mg
2,组织匀浆比例按照10%进行,相当于1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液要求用PBS,浓度是0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4我们并不要求没个样本的重量必须保持1g整数,只要大于50mg即可,相对应匀浆液按照1:9的关系随之改变即可
3,剪碎叶片组织放入碾钵,然后液氮碾磨成粉末,加入换算后的匀浆液的量
4,离心取上清
备注:换算结果是乘以加入匀浆液的量,除以称取的重量,这个最终换算比例相当于乘以9g除以1ml,如果检测细胞内部,需要加一个超声破碎过程!
组织匀浆三原则
剪碎叶片组织放入碾钵,然后液氮碾磨成粉末,加入换算后的均浆液的量。这个不会处理的话,可以直接邮寄叶片我们处理。

小鼠抗单核细胞抗体(AMA)elisa检测试剂盒样本需求量:
植物是组织样本,固体 要求的重量是大于50mg。血清血浆50微升以上,一个样本。对大鼠小鼠液体样本需求可以适当放宽,但必须大于10微升以上

组织匀浆原则:
1,对于样本要求保持鲜重
2,称取样本中的重量不小于50mg,一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平。
3,匀浆的比例选取10%,相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆。
4,匀浆液选取PBS(PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol/L)
5,匀浆过程选用组织匀浆器,冰浴上匀浆。(或者进行液氮碾磨)
6,离心取上清,离心转速选用5000转每分,时间是15分钟。取上清液待检!
血清血浆的收集
首先要求确定样本收集类型,血清还是血浆?一般情况收集血清为好,血清收集2种方法,如下:

1.促凝管(临床上用橘红色管头)待分层后取上清液保存

2.自然凝固,取普通生化试管,自然凝固30分钟以上,然后离心取上清,离心转速为2000转每分,时间15分钟。

全血收集完成后进了分离出血红细胞,避免导致溶血对实验产生干扰
其次涉及样本保存,因为不确定老师样本取样周期和实验周期到底有多长,这个过程涉及以下问题。

1.关于样本检测问题,如果样本取样周期过程,涉及到分不同时间段来检测,那么试剂盒的批次也会出现差异,会有一定的变异系数。这个过程有2个建议,第1,可以收集一定数量(满足一个试剂盒的量或者几个试剂盒的量)来进行一次实验。避免样本长时间保存(样本保存时间越长,蛋白降解风险越大),但缺点是会用到不同批次试剂盒,影响批间差。第二个就是把样本全部收集好了后,再一次进行实验,用同一批次试剂盒。这个可以减少批间差,但样本不同时间取样会导致前后样本数值之间会存在一定的差异性。这个还是要根据实际取样周期和取样量来做决定。

2.如果取样周期比较久,而且每次样本不是很多,每天或者短时间都有样本出来,这个情况样本涉及到保存。保存条件是1周内实验的,2-8℃,一周以上一个月以内实验,-20℃保存,一月以上-80℃保存。

血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
批号:现制备
有效期:6个月

 


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